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品牌 |
同立海源 |
无血清细胞冻存液(Serum-free Cell Freezing Medium)
产品货号:HC01
▶ 产品描述
本品为无色透明澄清溶液,有粘性,含 10 %DMSO。无细菌、真菌、支原体,pH=7.2~7.8,内毒 素< 1 EU/mL。用于-80℃、-196℃冷冻保存常用细胞系,不含蛋白质和任何动物源成分。
▶ 产品信息
▶ 使用说明
1. 准备细胞:
1.1 检查并确认细胞没有真菌、细菌、支原体污染;
1.2 冻存前的细胞处于增殖旺盛的对数生长期佳;
1.3 计数待冻存的细胞数量。悬浮细胞应180g离心5~10min后除去培养基,贴壁细胞应消化后 计数,再180g离心去培养基以获得细胞沉淀。
2. 细胞冻存:
2.1 确定细胞适宜的冻存密度和体积,计算应使用的细胞冻存液体积;
注:可使用的冻存密度为 1~10×10 6 /mL,推荐冻存密度为 2~5×10 6 /mL。冻存体积为 0.5~1mL/ 管。
2.2 吸取适量细胞冻存液重悬细胞,使用前产品应当2~8℃预冷。细胞重悬后应当立即分装至细 胞冻存管;
2.3 经冻存液重悬后的细胞不能在室温或2~8℃静置超过10min 以上,应当尽快将冻存管移入 -80℃低温冰箱,不采取任何程序降温措施或使用程序降温装置。如果无法立即移入-80℃低温冰 箱,至少应当先移入低于0℃环境中(如-20℃冰箱)短暂存放10 min 左右,同样不采取程序降 温;
2.4 -80℃冰箱过夜后的冻存管,若长期储存,可移入液氮罐中保存。若短期取用,可于-80℃短 期保存数月,保存时间效果因细胞类型而不同。
注:1.初次使用本产品冻存的细胞类型,应测试保存时间和效果后再使用; 2.参考数据:C3A 细胞以 1×10 6 /mL/管于-80℃保存 12 个月后复苏,即时活率>90%。
3. 细胞复苏:
3.1 先准备室温或37℃预温好的完全培养基,其体积为冻存液体积的9倍;
3.2 取出液氮或-80℃中的冻存管,置于37 ℃水浴并不断轻摇。待剩余1粒米大小的冰块时,迅 速移出水浴;
3.3 立即吸取冻存液至完全培养基中,轻柔吹打3~5次混匀。然后,180g 离心5~10分钟,获得细 胞沉淀备用。
4. 注意事项:
4.1 本产品于人员科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得 存放于普通住宅内;
4.2 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
4.3 分装后在-20℃冷冻保存,使用前解冻并充分混匀。
注意:For research and manufacturing use.
北京同立海源生物科技有限公司 | |||
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